Полный текст:
По химической природе вещество
является замещенным моно-амидом эфира
тио-угольной кислоты, это наверняка жидкость нерастворимая в воде, хорошо
растворима в большинстве полярных органических растворителей (этанол, метанол,
ацетон и др.) и также растворимо в неполярных, таких как хлороформ, этилацетат,
ДМФА.
Очень сильные кислотные свойства
(рКа = - 4,91) свидетельствуют о большой
агрессивности данного вещества, а также о возможности сорбшии через кожный
покров.
Как сложный эфир
вещество подвержено гидролитическому разложению, особенно в щелочной среде. При
увеличении рН на каждую единицу выше 7.0 скорость гидролиза увеличивается
приблизительно в 10 раз, при повышении температуры на 10 оС — почти
в 4 раза.
Вещество легко проникают через
неповрежденную кожу, слизистые оболочки, дыхательные пути и пищеварительный
тракт. Воздействие на организм происходит ингаляционным путем и через кожу,
перорально — при суицидальных попытках и случайном приеме внутрь.
Вещество может
подвергаются окислению (при участи различных оксилаз) либо гидролизироватся и
выводится в свободном и коиъюгированом
(с серной или глюкуроновой кислотой) виде. Реакции окисления включают N-деалкилрование,
О-деалкилирование, адкильное гидроксилирование, сульфоокисление, преврищение
N-метильных групп в N-формидные или N-гидроксиметильные группы, а
также образование дигидрокси производных ароматического кольца.
Как привило, метаболиты менее токсичны, чем исходное вещество.
Метаболиты быстро
выводятся с мочой. Скорее всего вещество биотрансформируется путем окисления,
гидролиза и коньюгации (с глюкуроновой или серной кислотой). Образовавшийся при
гидролизе гексагидронафтол снижают активность ХЭ, но ингибирование активного
центра фермента обратимо. Замещенные
тиокарбаматы угнетают активность ХЭ в 5—10 раз сильнее, чем диметилкарбаматы.
АХЭ способна гидролизовать вещество, хотя скорость гидролиза при этом будет
ниже, чем при гидролизе естественного субстрата фермента — АХ. Симптомы
отравления проявляются, если количество вещества в организме достигает того
уровня, при котором скорость гидролиза вещества превышает скорость гидролиза АХ
под действием фермента. При этом происходит накопление АХ в нейроэффекторном и
синаптическом пространстве, что ведет к клиническим проявлениям.
Подготовка
проб
Экстракция из
биологических жидкостей осложнена тем, что вещество легко разрушается щелочами.
Еще одной проблемой служит то, что вещество, как производное тиоугольной
кислоты, может легко реагировать с этанолом и ацетоном. Альтернативный способ –
жидкость-жидкостная экстракция.
Использование для ЖЖЭ
растворителей, различающихся по своей природе и полярности, позволяет получать
извлечения с наименьшим количеством соэкстрактивных веществ. Так, при
извлечении данного вещества из тканей органов трупа с помощью гексана или
петролейного эфира, смесей гсксаин и ацетона (в соотношении 90:10 и 70:30 соответственно) получают извлечения с
наименьшим числом соэкстрактивных вешеств. Использование в качестве
экстрагентов ацетонитрила, бензола, хлороформа, метанола, этанола значительно
увеличивает массу и число экстрактивных вешеств.
Твердые образцы
гомогенизируют с равной массой воды.
Пищевые продукты, содержимое желудка, особенно с неусвоенными остатками
пиши, или ткани желудка, гомогенизированные с водой, смешивают с насыщенным
раствором кальция хлорида, оставляют на ночь и фильтруют. Фильтрованный образен
или гомогенат в количестве 5—10 мл встряхивают 5 мин с равным объемом
смеси гексан — толуол (1:1. по объему).
Органический слой
отделяют центрифугированием и сохраняют. рН волной фракции доводят до 2.0
добавлением 1 М серной кислоты и затем извлекают равным объемом диэтилового
эфира. Водную фазу сохраняют для дальнейшего исследования. Толуол - гексановые
и эфирное извлечения объединяют и затем разделяют наравные части. Каждую часть
выпаривают досуха при 40 0С в токе азота. Первый сухой остаток растворяют
в 50 мкл толуола или гексана. Аликвоту от 5 до 10 мкл помешают на пластину для
тонкослойной хроматографии, аликвоту от 1 до 2 мкл подвергают анализу методами
ГХ или ГХ-МС. Два других остатка и водную фазу сохраняют дли деривитизации и/или дополнительных испытаний, которые могут
быть частью процедур подтверждения или скрининг.
Для очистки экстрактов
от липидов ни первом этапе эффективным методом является вымораживание. На
последующих этапах применяют экстракционную очистку, хроматографические методы:
препаративную тонкослойную хроматографию, колоночную хроматографию, гельпроникающую
или флеш-хроматографию. Для выделения вещества и
удаления мешающих примесей можно применить ультразвуковую, микроволновую,
сверхкритическую жидкостную (СЖЭ) сверхкритическую флюидную экстракцию и др. СЖЭ селективна и позволяет использовать
небольшие объемы растворителя Сверхкритические жидкости имеют плотность,
близкую к плотности обычных жидкостей, но меньшую вязкость и высокий
коэффициент диффузии. Автоматизация процесса позволяет проводить экстракцию и
очистку быстро и в один этап. Хорошие результаты получаются для полярных и
малополярных тиоуреатов.
Определение
Одним из наиболее
простых и распространенных методов определения тиоуреатов является ТСХ. При
исследовании данного вещества можно использовать пластины с силикагелсм или с
оксидом алюминия. Подвижной фазоой могут быть однокомнонентные системы растворителей
(гексан, бензол, хлороформ, ацетон и др.), но для разделения смесей содержащих
тиоуреаты и идентификации их по величинам Rf, наиболее результативны
двух- и трехкомпонентные системы растворителей на основе гексана и толуола с
добавлением полярных растворителей (ацетон, хлороформ, бензол, диэтиловый эфир,
этилацетат). При проведении ХТА для скрининга вещества возможно применение хроматографических
систем: силикагель 60 F254 система растворителей гeксан
— ацетон (80:20) или толуол — ацетон (95:5), проявительные реагенты. Обнаружение
вещества: после опрыскивания хроматограмм раствором аммиаката серебра в ацетоне
и последующего облучения в УФ-свете такие пестипилы проявляются в виде темных
пятен. Соединения, содержащие донорные атомы серы детектируют реакцией с
бромфеноловым синим.
По химической природе вещество
является замещенным спиртом на фенантидине, это наверняка кристаллическое
вещество, малорастворимое в воде, хорошо растворима в большинстве полярных
органических растворителей (этанол, метанол, ацетон и др.) и также растворимо в
неполярных, таких как хлороформ, этилацетат, ДМФА.
Достаточно сильные кислотные
свойства (рКа2 = 1,38) и слабые основные свойства
свидетельствуют о невысокой
агрессивности данного вещества. В щелочной среде может образовывать соли с
сильными едкими щелочами (КОН, NaOH) образуя таутомер по нитрогруппе. В кислой
среде образует соли с сильными минеральными кислотами по третичному атому
азота.
Вещество может попасть в
организм через дыхательные пути и пищеварительный тракт. Воздействие на
организм происходит ингаляционным путем, перорально — при суицидальных попытках
и случайном приеме внутрь. Вещество может подвергаются окислению (при участи
различных оксилаз) либо гидролизироватся и выводится в свободном и коиъюгированом (с серной или глюкуроновой
кислотой) виде. Реакции окисления включают таутомерное превращение гидрокси
группы в окси группу ароматического кольца с образованием
3-нитро-3-Н-фенантридин-8-она.
Скорее всего вещество
биотрансформируется путем окисления. При приеме внутрь абсорбция в основном
осуществляется в тонкой кишке. Всасывается примерно 10% принятой дозы, возможно
накопление в легких , почках, остальное выводится из организма в первые 2 ч. Биотрансформация
может осуществлятся при участии дегидрогеназ с образованием АФК. Вещество
возможно захватывается альвеолитами а затем в них начинается цикличный процесс
НАДФ -НАДФН-зависимого восстановления и окисления с образованием катиона фенантридиния
и АФК. которые повреждает клеточные мембраны. Отравление веществом может
привести к почечной недостаточности и прогрессирующему легочному фиброзу, что
может вызвать смерть от остановки дыхания через 2—3 недели после отравления.
Подготовка
проб
Извлечение данного
вещества из тканей органов трупа осуществимо с помощью с помощью диэтилового
эфира при рН >7 с наименьшим числом
соэкстрактинных вешеств. Использование в качестве экстрагентов ацетонитрила,
бензола, хлороформа, метанола, этанола значительно увеличивает массу и число
экстрактивных вешеств. Твердые образцы гомогенизируют с равной массой воды и
затем экстрагируют диэтиловым эфиром. Фильтрованный образен или гомогенат в
количестве 5—10 мл встряхивают 5 мин с равным объемом смеси диэтилового эфира
(1:1. по объему). Органический слой отделяют центрифугированием и сохраняют. Для выделения вещества и удаления мешающих
примесей можно применить сверхкритическую жидкостную (СЖЭ) экстракцию. СЖЭ селективна и позволяет использовать
небольшие объемы растворителя Сверхкритические жидкости имеют плотность,
близкую к плотности обычных жидкостей, но меньшую вязкость и высокий
коэффициент диффузии. Автоматизация процесса позволяет проводить экстракцию и очистку
быстро и в один этап.
Определение
Наиболее широко
используемый метод для соединений данного типа — колориметрическое определение
после реакции с натрия дитионом в щелочной среде. Продукты реакции имеют
максимумы поглощения при 396 - 379 нм. Используя технику ионно-парной
экстракции, можно достичь предел обнаружения 50 мкг/л. Однако метод имеет серьезные
ограничения, так как невозможно включить в процедуру определения внутренний стандарт.